微生物检验方法的介绍及其意义


微生物检验方法的介绍及其意义

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微生物的检测 , 无论在理论研究还是在生产实践中都具有重要的意义 , 下面我们一起来看看微生物检验方法以及重要意义介绍 。

微生物检验方法的介绍及其意义

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微生物检验方法的介绍及其意义
在合适的外部条件下 , 微生物细胞不断吸收营养物质 , 并根据自己的代谢模式进行代谢 。如果同化的速度超过了异化的速度 , 原生质的总量(重量、体积、大小)就会不断增加 , 从而出现个体生长的现象 。如果这是一种平衡生长 , 即当各个细胞成分以适当的比例生长时 , 达到一定程度后就会发生繁殖 , 从而引起个体数量的增加 。这时 , 原来的个体已经发展成一个群体 。随着人口中每个个体的进一步增长 , 它导致了这个人口的增长 , 这可以通过它的体积、重量、密度或浓度来衡量 。微生物的生长不同于其他生物 。微生物的个体生长在科学研究中是困难的 , 通常没有实际意义 。微生物以数量取胜 , 因此 , 微生物的增长通常指的是种群的扩张 。微生物的生长繁殖是内外环境因素相互作用的综合反映 。因此 , 生长和繁殖可以作为研究各种生理、生化和遗传问题的重要指标 。同时 , 微生物在生产实践中的各种应用或致病性和霉变微生物的防治都与其生长抑制密切相关 。因此 , 有必要介绍微生物生长的检测方法 。由于生长意味着原生质含量的增加 , 所以测定方法都是直接或间接基于亚质量 , 而繁殖的测定应该基于计数 。微生物的生长可以通过其重量、体积、密度和浓度来衡量 。

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生长测量方法
容量法:又称菌丝体浓度测量法 。
通过测量一定体积的培养基中含有的菌丝量 , 可以反映微生物的生长状态 。方法如下:取一定量的待测培养液(如10毫升)放入有刻度的离心管中 , 设定一定的离心时间(如5分钟)和转速(如5000转/分) , 离心后倒出上清液 , 测量上清液体积为v , 则菌丝浓度为(10-v)/10 。菌丝浓度测量是大规模工业发酵生产中微生物生长的重要监测指标 。这种方法广泛、简单、快速 , 但需要设定一致的处理条件 , 否则会有很大的偏差 , 因为离心沉淀物中混入了一些固体营养物质 , 结果会有一定的偏差 。
根据干重法:
可以通过离心或过滤来确定 。一般干重为湿重的10-20% 。离心法是将一定体积待测培养液倒入离心管中 , 设定一定的离心时间和转速 , 离心 , 用清水离心洗涤1-5次 , 干燥 。干燥可以在105℃或100℃烘箱中进行 , 也可以用红外线进行 , 也可以在80℃或40℃真空干燥 , 干燥后称重 。如果采用过滤 , 丝状真菌可以用滤纸过滤 , 细菌可以用醋酸纤维素膜等滤膜过滤 。过滤后 , 用少量水洗涤 , 在40℃真空干燥 。干法重复法比较繁琐 , 当得到的微生物产品是菌体时 , 如活性干酵母(ADY) , 一些以微生物菌体为活性物质的饲料和肥料等 , 常采用干法重复法 。
浊度法:
微生物的生长导致培养物的浊度增加 。用紫外分光光度计测量一定波长下的吸收值 , 判断微生物的生长状态 。一个特殊的带侧臂的三角烧瓶可以用来定期跟踪某个培养物中细菌的生长 。通过将侧臂插入光电比色计的比色座孔中 , 可以随时测定其生长情况 , 而无需取菌液 。该方法主要用于监测发酵工业中细菌的生长 。比如我的研究使用UNICO公司的紫外-可见分光光度计 , 用比色管在600nm波长下定期测定发酵液的吸光度值OD600 , 从而监测大肠杆菌的生长和诱导时间

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菌丝长度测量方法:
对于丝状真菌和一些放线菌 , 可以在培养基上测量一定时间内菌丝的生长长度 , 或者用一端开口、有刻度的细玻璃管 , 放入合适的培养基中 , 水平放置 , 在开口一端接种微生物 , 记录一段时间后菌丝的生长长度 , 从而测量丝状微生物的生长情况 。微生物计数法


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